沪科教版·生物学高三上册《第一章发酵工程利用微生物进行规模化生产》练习题

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本单元考点（5 个）

微生物的分离、培养与计数培养基的配制与无菌技术传统发酵技术的应用微生物的筛选与纯化方法发酵工程的基本流程与应用

本单元练习题（18 题）

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1. 某实验室欲从土壤中筛选能高效分解纤维素的微生物并进行纯化培养。下列操作与说法正确的是：A. 应选用牛肉膏蛋白胨培养基，并以纤维素为唯一氮源进行选择培养；B. 接种前需对培养基进行干热灭菌，接种环则采用灼烧灭菌；C. 稀释涂布平板法分离到的单个菌落即为目标菌，可直接判定其分解纤维素能力最强；D. 平板划线时每次划线前后均需灼烧接种环，最后一次划线不能与首次划线区域重叠。

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2. 某家庭作坊制作果醋和泡菜，操作如下：①葡萄榨汁后煮沸冷却，接种酵母菌，密封发酵制果酒，再通入无菌空气继续发酵制果醋；②白菜洗净晾干后加盐腌制，装坛时压实并注满盐水没过菜面，密封坛口水槽，室温放置数周得泡菜。下列分析正确的是 A. 果酒发酵阶段需不断通入无菌空气，保证酵母菌大量增殖 B. 果醋发酵阶段醋酸菌将乙醇转变为醋酸，需要充足氧气 C. 泡菜坛口注满盐水的主要目的是补充水分供白菜吸收 D. 加盐腌制的目的是彻底杀灭白菜表面所有微生物

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3. 某科研小组从堆肥中筛选能高效降解淀粉的微生物。先将样品悬液接种在以淀粉为唯一碳源的选择培养基上培养，得到多个菌落；再在平板中滴加碘液，挑取透明圈直径（H）与菌落直径（D）比值最大的菌落进行划线纯化。每次划线前后均需对接种环进行____处理；划线的目的是通过划线次数增多使菌液逐渐稀释，最终获得由____个细胞繁殖而来的单菌落，即完成微生物的纯化。挑取菌落时依据的筛选原理是：只有能产生____并分解淀粉的微生物，才能在其菌落周围形成透明圈。

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4. 某同学为估算酸奶样品中乳酸菌的活菌数，将样品依次梯度稀释后，取0.1 mL稀释度为10⁴的稀释液接种于固体培养基表面并涂布均匀，37℃恒温培养48小时后，选取菌落数在30~300之间的平板计数，三个重复平板的菌落数分别为56、58、60。接种前所有器材均经灭菌处理，培养基经高压蒸汽灭菌并冷却后再接入菌种。则该计数方法称为____，原样品中乳酸菌活菌数约为____个/mL。

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5. 某工厂拟筛选一株产淀粉酶的芽孢杆菌并规模化培养。技术员用牛肉膏、蛋白胨、可溶性淀粉配制培养基，其中提供碳源和氮源的主要是____；为除去芽孢杆菌芽孢，培养基常用高压蒸汽灭菌法，通常在压力为100 kPa、温度为____℃的条件下维持15～30 min；灭菌后的培养基须经____试验，确认无杂菌污染后方可用于接种培养。

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6. 某小组配制1L牛肉膏蛋白胨培养基：先称取牛肉膏3g时，因牛肉膏黏稠，正确做法是将其放在小烧杯中称量，再用热水熔化后倒入；随后依次加入蛋白胨、NaCl并定容。关于该配制与灭菌过程的叙述，正确的是 A．牛肉膏黏稠难称量，可凭经验估算用量以保证结果准确 B．调pH应在加入牛肉膏、蛋白胨之前完成，避免蛋白质凝固影响测定 C．分装后采用高压蒸汽灭菌，芽孢需在121℃、100kPa下15~30min才能被彻底杀灭 D．为防止杂菌污染，培养基配制完成后应立即倒平板再灭菌

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7. 某企业拟利用能分泌胞外酶的菌株进行规模化生产，要求降低杂菌污染并获得酶制剂。下列流程最合理的是（）A. 菌种选育→培养基配制→培养基及设备灭菌→菌种扩大培养→接种发酵→分离菌体→提取纯化发酵液中的酶 B. 菌种选育→培养基配制→接种发酵→培养基及设备灭菌→菌种扩大培养→分离菌体→提取纯化酶 C. 菌种选育→菌种扩大培养→培养基配制→接种发酵→培养基及设备灭菌→分离菌体→提取纯化酶 D. 菌种选育→培养基配制→培养基及设备灭菌→菌种扩大培养→接种发酵→破碎菌体→提取纯化胞内酶

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8. 某家庭用梨汁制作食醋：先接种酵母菌并密封发酵，待产生酒味后，再接种醋酸菌并持续供氧。第二阶段发生的主要发酵过程是____。

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9. 某小组从果园土壤中筛选能高效分解果胶的微生物并进行纯化。下列操作与分析正确的是（　　） A. 应以果胶为唯一氮源配制选择培养基，接种前需用干热灭菌法对培养基进行灭菌 B. 稀释涂布平板法接种时，涂布器需浸酒精并灼烧灭菌，冷却后再涂布，可得到分布均匀的单菌落 C. 平板划线纯化时，每次划线前后均需灼烧接种环，最后一区域的划线应与上一区域部分重叠以提高产量 D. 在含果胶的选择培养基上培养后，应挑选透明圈直径与菌落直径比值较小的菌落，因其分解果胶能力最强

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10. 某研究小组欲从土壤中筛选出能高效分解纤维素的微生物并进行纯化培养。下列操作正确的是（　　） A. 以纤维素为唯一碳源的选择培养基上培养后，挑取出现透明圈的菌落即可获得纯种 B. 用稀释涂布平板法接种后，挑取单菌落接种到斜面培养基上保藏，可达到纯化目的 C. 用平板划线法接种时，划线前后均需将接种环灼烧灭菌，划线次序与稀释程度无关 D. 筛选与纯化全程可在开放环境下进行，只要培养基经过高压蒸汽灭菌即可

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11. 配制固体微生物培养基时，培养基灭菌后应在适宜温度下倒平板；倒平板前，培养基通常采用____灭菌。

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12. 为估算发酵液中的活菌数，实验者将样品进行梯度稀释，取定量稀释液涂布于固体培养基，培养后根据形成的菌落数进行推算。这种方法称为____。

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13. 将土壤悬液接种到固体培养基表面，用接种环连续划线使菌体逐步分散，培养后获得分散的单菌落，这种微生物分离方法称为____。

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14. 配制并接种微生物培养基时，下列操作符合无菌技术要求的是（　　）A. 接种前将接种环在火焰上灼烧灭菌 B. 用手触摸已灭菌培养基的表面 C. 将未灭菌的器具直接伸入培养基 D. 接种时让培养基容器长时间敞口

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15. 配制固体微生物培养基时，下列操作顺序正确的是（　　）A. 称量并溶解各成分→调节pH→分装→灭菌 B. 称量并溶解各成分→灭菌→调节pH→分装 C. 调节pH→称量并溶解各成分→分装→灭菌 D. 分装→称量并溶解各成分→调节pH→灭菌

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16. 某厂拟用筛选得到的微生物生产一种可溶性代谢产物。为使生产流程完整且顺序合理，下列操作排列正确的是（）A. 菌种选育→培养基配制→发酵罐灭菌→菌种扩大培养→接种→发酵→产品分离提纯 B. 菌种选育→菌种扩大培养→培养基配制与灭菌→接种→发酵→产品分离提纯 C. 培养基配制与灭菌→菌种选育→接种→菌种扩大培养→发酵→产品分离提纯 D. 菌种选育→培养基配制与灭菌→接种→发酵→菌种扩大培养→产品分离提纯

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17. 某家庭按传统方法制作泡菜和腐乳：制作泡菜时，所用菌种主要是____，发酵过程中需将泡菜坛坛沿水槽注满清水并加盖，其目的是隔绝空气，营造无氧环境以利于该菌种产生____（填一种有机酸）；制作腐乳时，起主要作用的微生物是____，该菌产生的酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质，使腐乳具有独特的风味。

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18. 在统计某发酵液中活菌数目时，实验者采用稀释涂布平板法，为保证结果准确，通常选择菌落数在____范围内的平板进行计数。用该方法测得的菌落数往往比活菌实际数目偏____（填“高”或“低”），原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

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第一章细胞构成生物体（18题）第一章遗传信息主要编码在 DNA 分子上（18题）第一章同种生物构成动态的种群（18题）第一章人体的内环境要维持在相对稳定状态（18题）第二章细胞由多种多样的分子组成（18题）第二章细胞工程通过细胞水平的操作获得产品（18题）第二章不同种群的生物形成动态的生物群落（18题）第二章有性生殖中的染色体变化（18题）第二章人和动物通过神经系统调节生命活动（18题）第三章细胞具有分工合作的复杂结构（18题）第三章基因工程赋予生物新的遗传特性（18题）第三章生态系统是具有一定结构和功能的统一体（18题）

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