沪科技版·生物学高三上册《第3章基因工程》练习题

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本单元考点（6 个）

基因工程的基本工具目的基因的获取方法基因表达载体的构建目的基因导入受体细胞的方法转基因生物的检测与鉴定基因工程的应用

本单元练习题（18 题）

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1. 科研人员欲获得某真核生物的目的基因。已知该基因的编码区包含内含子，若直接从基因组文库中获取，则在受体大肠杆菌中表达时会产生错误产物；若从cDNA文库中获取，则获得的基因缺少非编码区（如启动子）；若已知该基因的核苷酸序列且长度较短，则可通过____方法直接人工合成；若以该基因转录的mRNA为模板，在____酶作用下逆转录获得cDNA，再经PCR大量扩增，是获取不含内含子的目的基因的常用途径。综合上述，欲在大肠杆菌中表达该基因，最宜从____文库中获取目的基因。

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2. 科学家拟将抗虫基因Bt与质粒构建基因表达载体。已知目的基因两端含有限制酶识别序列：左端含BamHⅠ（识别序列GGATCC），右端含BamHⅠ，若用同种限制酶切割，目的基因两端产生相同黏性末端，易出现自身环化及反向连接。为避免该问题，研究者选择两种不同限制酶对目的基因和质粒进行双酶切。构建表达载体时，除需要限制酶外，还必须使用____酶将目的基因与质粒的黏性末端连接；启动子位于目的基因的____（填“上游”或“下游”），其作用是____；为了筛选出含有重组质粒的受体细胞，表达载体上还应具备的结构是____。

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3. 科研人员拟将人胰岛素基因导入大肠杆菌表达。已知该基因含内含子，且大肠杆菌缺乏剪切内含子的机制。为此应从胰岛B细胞中提取mRNA，经____过程获得cDNA，再构建cDNA文库从中筛选目的基因；若已知该基因的核苷酸序列且序列较短，也可用____方法直接人工合成。与直接从基因组文库中获取相比，从cDNA文库获取的该基因因缺失了____结构，故能在原核受体细胞中正确表达。

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4. 某研究小组拟从一种淡水蓝细菌中获取耐高温蛋白基因（目的基因）。该基因全长约3200 bp，碱基序列未知，且蓝细菌为原核生物，基因中不含内含子。下列获取目的基因的方法中，最适宜的是（　　）A. 从该蓝细菌的cDNA文库中筛选获取　B. 根据已知序列用化学方法人工合成　C. 构建该蓝细菌的基因组文库，再用相应探针筛选　D. 以该蛋白的mRNA为模板逆转录后直接作为目的基因使用

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5. 科学家将控制抗旱蛋白合成的目的基因导入小麦细胞，经组织培养获得抗旱转基因小麦，该小麦能将抗旱性状稳定遗传给后代。上述成果主要体现了基因工程应用的哪一方面？A. 基因治疗 B. 转基因植物育种 C. 转基因动物育种 D. 工程菌生产药物

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6. 将某抗虫基因导入水稻受体细胞时，科研人员采用农杆菌转化法。下列相关叙述正确的是（　　） A. 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可将抗虫基因转移并整合到水稻细胞的染色体DNA上 B. 将抗虫基因直接注射进水稻花粉即可完成转化，无需载体 C. 该方法中农杆菌的作用仅是提供能量，不参与DNA转移 D. 为提高转化效率，应先用高浓度蔗糖彻底杀死农杆菌后再共培养

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7. 研究人员将编码人胰岛素的基因导入酵母细胞，使酵母能够生产人胰岛素。这体现了基因工程在____方面的应用。

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8. 研究者拟构建含目的基因的植物表达载体。已知候选载体含有复制起点、筛选标记基因、目的基因编码区和转录终止序列，且目的基因编码区方向正确；若要使目的基因能够在植物细胞中启动转录，还必须在其上游加入____。

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9. 关于基因工程的基本工具，下列叙述正确的是（）。A. 限制性核酸内切酶可将目的基因导入受体细胞 B. DNA连接酶可识别特定核苷酸序列并切割DNA C. 载体可携带目的基因进入受体细胞 D. 解旋酶可将目的基因与载体连接起来

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10. 研究人员拟将目的基因导入不同受体细胞。下列方法与其常用受体细胞的配对正确的是（　　）A. 农杆菌转化法——动物受精卵 B. CaCl₂处理法——植物原生质体 C. 显微注射法——动物受精卵 D. 基因枪法——大肠杆菌

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11. 某转基因作物的目的基因可用特异性PCR检测，其表达产物可用抗体检测。对4株待测植株取样，PCR均检出植物内源基因；目的基因扩增结果为甲、丙阳性，乙、丁阴性。抗体检测中，甲、乙检出目的蛋白，丙、丁未检出；阳性、阴性对照结果均符合预期。哪株可判定为含有目的基因且该基因已表达？ A.甲 B.乙 C.丙 D.丁

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12. 构建细菌基因表达载体时，研究者在目的基因两端设置不同的限制酶切口，并在载体相应位置设置互补切口，使目的基因只能按启动子指向的方向接入。该设计实现了目的基因的____。

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13. 下列关于基因工程基本工具的叙述，错误的是（　　）。A. 同一种限制酶切割后产生的黏性末端碱基序列相同，可相互配对连接 B. 限制酶识别的核苷酸序列一般呈回文结构，识别序列越短，DNA中被切出的位点越多 C. 大肠杆菌质粒经改造后可作为载体，其上的标记基因可用于筛选含有目的基因的受体细胞 D. DNA连接酶连接的是目的基因与载体切口处的磷酸二酯键，也能切开DNA双链的氢键

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14. 某目的基因两端分别带有 EcoRI 和 BamHI 识别位点，质粒载体也各含一个 EcoRI、BamHI 位点。若希望限制目的基因插入载体后方向唯一，下列操作及判断正确的是（）。A. 目的基因和质粒均用 EcoRI 酶切，再由 DNA 连接酶连接，可保证方向唯一 B. 目的基因和质粒均用 EcoRI、BamHI 双酶切，再由 DNA 连接酶连接，两种不同末端使目的基因只能按一种方向连接 C. 目的基因和质粒均用 DNA 连接酶处理，再由 EcoRI、BamHI 连接形成重组质粒 D. 目的基因用 EcoRI 酶切、质粒用 BamHI 酶切，两种酶产生的末端相同，可由 DNA 连接酶连接

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15. 构建基因表达载体时，目的基因必须插入载体中启动子和终止子之间的区域，才能在受体细胞中正常表达。启动子的作用是提供____识别和结合的位点，从而驱动目的基因转录；终止子的作用是使转录在目的基因的____端正常停止。此外，表达载体上通常还含有标记基因，其作用是便于____含有目的基因的受体细胞。

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16. 某转基因水稻候选株的叶片DNA经PCR检测，目的基因片段和水稻内源参照基因均出现预期条带；不加模板的PCR对照无条带，已知含目的基因的阳性对照出现预期条带。取该候选株蛋白进行抗体检测，出现与阳性蛋白对照位置相同的特异条带，非转基因水稻无此条带。据此可判定该候选株____。

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17. 某质粒和目的DNA分别经限制酶甲、乙切割后形成待连接末端。已知甲产生的单链突出端序列为5′-AGTC-3′，乙产生的突出端与其碱基互补；两种酶的识别序列不同，且切割后各DNA片段均完整。下列关于构建重组DNA的叙述，正确的是（　　）A. 甲、乙切出的末端因识别序列不同而不能连接 B. 两种末端可通过碱基互补配对，再由DNA连接酶连接 C. DNA连接酶识别甲的识别序列并切开磷酸二酯键 D. 末端配对后无需DNA连接酶即可形成稳定的重组DNA

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18. 为鉴定某转基因棉花植株中外源抗虫基因是否成功表达，科研人员提取该植株叶片的总RNA，经逆转录获得cDNA，再用抗虫基因特异性引物进行扩增，结果出现预期条带。该检测方法属于____水平的检测，其检测的物质基础是抗虫基因转录形成的____；若要进一步从蛋白质水平验证，可采用的技术是____。

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