基因表达载体的构建 — 生物学填空题
题目
科学家拟将抗虫基因Bt与质粒构建基因表达载体。已知目的基因两端含有限制酶识别序列：左端含BamHⅠ（识别序列GGATCC），右端含BamHⅠ，若用同种限制酶切割，目的基因两端产生相同黏性末端，易出现自身环化及反向连接。为避免该问题，研究者选择两种不同限制酶对目的基因和质粒进行双酶切。构建表达载体时，除需要限制酶外，还必须使用____酶将目的基因与质粒的黏性末端连接；启动子位于目的基因的____（填“上游”或“下游”），其作用是____；为了筛选出含有重组质粒的受体细胞，表达载体上还应具备的结构是____。