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某种限制性内切酶的识别序列为 5'-GAATTC-3'，在 G 与 A 之间切割双链 DNA，切割后产生的两端各带 5' 端突出的 4 个核苷酸的单链黏性末端。若某环状质粒上仅含该酶的 1 个识别位点，用此酶完全切割后，每个片段两端的黏性末端____（填“能”或“不能”）与同批产生的其他片段的黏性末端互补配对；若改用另一种在识别序列中间平端切割的酶处理同一质粒，则产生的两个平末端之间____（填“能”或“不能”）直接相互连接。
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某实验室以一段双链DNA为模板进行PCR扩增，反应体系中初始含该模板双链分子1000个，共进行25个循环。假设扩增效率为100%，且每一循环所有双链DNA分子均完整复制一次。（1）理论上第25个循环结束后，反应体系中该目标片段的双链分子总数是多少？（用科学记数法表示）（2）若PCR扩增的特异性主要取决于哪一步骤中的哪种物质与模板的退火配对？请简述其生物学意义。
琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，凝胶浓度越高，孔径越小，对DNA分子的分子筛阻力越大。在电场强度和缓冲液条件相同的前提下，同一双链DNA片段（大小相同）在1.0%凝胶中的迁移速率____（填“大于”或“小于”）在1.5%凝胶中的迁移速率；而对于同一种浓度的凝胶，两个不同大小的双链DNA片段中，较小片段的迁移速率____（填“大于”或“小于”）较大片段。综合以上两点，欲较好地分离大小相近的DNA片段，应适当____（填“提高”或“降低”）凝胶浓度。
某原核操纵子的基因顺序为：启动子（P）—操纵基因（O）—结构基因Z—终止子。在野生型中，阻遏蛋白与O位点结合可阻止转录。现获得两种突变：①O位点突变，使阻遏蛋白无法结合；②调节基因突变，产生的阻遏蛋白失去与O位点结合的能力。将两种突变分别单独引入后检测Z基因表达。下列关于操纵子基本结构与两种突变效应的判断，正确的是： A. O位点是编码阻遏蛋白的基因；突变①和②均导致Z基因组成型表达 B. O位点是阻遏蛋白的结合位点；突变①和②均导致Z基因组成型表达 C. O位点是阻遏蛋白的结合位点；仅突变①导致Z基因组成型表达，突变②不影响表达 D. O位点是RNA聚合酶的结合位点；突变①和②均使Z基因不表达
某真核基因启动子基础转录水平为2个单位。其上游增强子含三个转录因子结合位点A、B、C：转录因子A结合后使转录水平提升4倍，B提升3倍，C提升2倍，各因子效应相互独立、可叠乘。已知B的结合依赖于A先结合（若A未结合，B不能结合）。当A、B、C三者同时结合时，还存在协同效应，使转录水平再额外提升5倍。（1）若细胞中只有A和C结合，转录水平为多少单位？（2）若A、B、C三者均结合，转录水平为多少单位？
在某真核细胞中转入针对内源基因K的mRNA的siRNA双链体，RNAi途径被激活后，K的mRNA以一级动力学降解，降解半衰期t₁/₂ = 2小时（RISC对靶mRNA的切割速率在此阶段视为唯一决定因素）。设转入siRNA后即刻（t=0）细胞内K的mRNA量为100个相对单位，此后无新合成的K mRNA补充。问：转入siRNA后经过多少小时，K的mRNA量降至6.25个相对单位（即初始量的1/16）？
真核细胞中，某种应激刺激使eIF2α的α亚基第51位丝氨酸被磷酸化。已知eIF2-GTP需将Met-tRNAi递送至40S小亚基形成起始复合物，随后GTP水解为GDP，eIF2-GDP需经eIF2B催化交换GDP为GTP才能再次参与起始。据此，磷酸化后eIF2α将持久抑制蛋白____（填一种细胞内大分子物质名称）的____过程，该调控发生在翻译水平的____阶段（填起始/延伸/终止）。
某工程化大肠杆菌菌株中，乳糖操纵子的转录速率可用如下模型定量描述：基础转录速率为每分钟10个转录本。当无乳糖时，阻遏蛋白与操纵基因结合，使转录速率降至基础水平的10%；当有乳糖时，阻遏抑制完全解除。在抑制解除的前提下，若葡萄糖不存在，cAMP-CAP复合物结合使转录速率提高至当前水平的5倍；若葡萄糖存在，则无此激活。分别计算：(1) 葡萄糖存在、乳糖存在时；(2) 葡萄糖不存在、乳糖存在时；(3) 葡萄糖不存在、乳糖不存在时，操纵子每分钟的转录本数。
在大肠杆菌色氨酸操纵子中，前导序列依次包含序列1、2、3、4及随后的多聚U衰减子序列。某突变株的序列1被完全缺失，其余序列保持不变。当培养基中色氨酸浓度很高时，该突变株前导转录物中优先形成的配对结构是____（填“2-3茎环”或“3-4茎环”），此时衰减作用____（填“发生”或“不发生”），结构基因的转录____（填“终止”或“通读”）。
某突变菌株的色氨酸操纵子中，前导序列（trpL）的两个色氨酸密码子被点突变为非色氨酸密码子，其余序列（包括衰减子形成的茎环结构所需区域）均正常。当培养基中色氨酸浓度从高降到极低时，关于该突变株色氨酸合成酶系的表达水平变化，下列叙述正确的是：A. 低色氨酸时衰减子正常终止，表达量始终低于野生型 B. 低色氨酸时核糖体停滞于突变密码子处，3区与4区无法配对，衰减终止不能发生，表达量高于野生型中的衰减状态 C. 无论色氨酸浓度高低，操纵子均被阻遏蛋白完全关闭 D. 高色氨酸时该突变株的表达量反而高于野生型
在大肠杆菌lac操纵子中，阻遏蛋白在无乳糖（无诱导物）时与操纵基因结合而阻止结构基因转录；当乳糖存在时，诱导物使阻遏蛋白构象改变而脱离操纵基因，转录得以启动。据此回答：这种由阻遏蛋白介导的调控方式属于____调控（填“正”或“负”）；若操纵基因发生突变导致阻遏蛋白无法与之结合，则无论乳糖是否存在，结构基因均持续转录，该突变表型称为____突变（填表型类型）。
在大肠杆菌乳糖操纵子中，阻遏蛋白与乳糖（诱导物）结合后发生构象变化，使其不能与操纵基因结合；同时cAMP-CAP复合物结合于启动子上游促进转录。据此判断，下列哪种情况下lac操纵子转录水平最高？A. 无乳糖、葡萄糖充足 B. 有乳糖、葡萄糖充足 C. 有乳糖、无葡萄糖 D. 无乳糖、无葡萄糖
某原核生物mRNA的开放阅读框长453个核苷酸（含起始密码子和终止密码子，且不含任何内部终止密码子）。已知翻译起始消耗1分子GTP，延伸阶段每掺入1个氨基酸消耗2分子GTP，终止阶段不消耗GTP。请计算：（1）该开放阅读框编码的多肽链含多少个氨基酸（不含起始甲硫氨酸的水解丢失，按密码子数计）；（2）完成一条该多肽链的完整翻译共消耗多少分子GTP。
某大肠杆菌tRNA成熟后3'端序列为CCA，氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸的α-羧基与该末端A76的____（写出具体羟基位）以酯键相连形成氨酰-tRNA。若该tRNA反密码子5'端第34位（摆动位）为G，依据摆动假说，其可识别的mRNA密码子第三位碱基为____和____（按出现频率高低顺序填写）。
RNA编辑是指在mRNA水平上改变核苷酸序列，从而改变其编码信息的现象。锥虫线粒体细胞色素氧化酶亚基II的mRNA前体中，其基因编码区缺失了4个尿嘧啶核苷酸，正是在转录后由-guide RNA指导，通过在这4个位点逐一____（选填一种核苷酸改变方式）的方式，才使成熟mRNA恢复成可读码框、翻译出功能完整的蛋白质。这表明RNA编辑的意义在于____（选填“扩大了遗传信息的多样性”或“仅起修复DNA复制错误的作用”），即基因的编码信息可以在RNA水平上被重新修饰。
某研究者在体外翻译体系中加入一条人工合成的mRNA：5'-AUG CCC ACC AAU UGA-3'。关于该mRNA指导翻译所体现的遗传密码特点，下列叙述正确的是（ ） A. 若第三个密码子由ACC突变为ACG，编码的氨基酸一定改变，说明密码子无简并性 B. 终止密码UGA的出现表明翻译在mRNA任一位置遇到UGA均可立即终止，体现密码阅读的方向性 C. 密码子在mRNA上以三个相邻碱基为一组被连续阅读、既不重叠也不跳读，体现密码阅读的连续性（无逗号） D. 密码子AUG既是起始密码子又编码甲硫氨酸，说明同一种氨基酸可有多个密码子
某突变tRNA^Tyr的反密码子由GUA突变为CUA，但其3′端CCA序列及被酪氨酰-tRNA合成酶识别的个性元件均未改变。将该突变tRNA在体外氨酰化后加入无细胞翻译体系。下列关于该氨酰化产物在翻译中所起作用的推断，正确的是： A. 氨酰化失败，因反密码子突变使合成酶无法识别 B. 携带酪氨酸，可识别mRNA上的UAG密码子并掺入酪氨酸 C. 携带酪氨酸，仍按原方式识别UAC密码子 D. 被切割为无功能片段，因反密码子环无法参与翻译
某双链DNA片段中，一条链序列为 5'-TGCATTCGT-3'（第7位的C为5-甲基胞嘧啶），另一条链为其互补链。现将该片段同时暴露于两类损伤因素：①亚硝酸（HNO₂）使两条链上所有胞嘧啶（含5-甲基胞嘧啶）发生氧化脱氨基；②254 nm紫外线在两条链上相邻两个胸腺嘧啶之间形成环丁烷嘧啶二聚体。则发生脱氨基反应的胞嘧啶总数为____个，形成的嘧啶二聚体总数为____个。
在原核生物翻译过程中，肽链延伸阶段每添加一个氨基酸，核糖体沿mRNA移动的距离和所需的GTP分子数分别是（ ） A. 一个密码子（3个核苷酸），2个 B. 一个密码子（3个核苷酸），1个 C. 一个核苷酸，2个 D. 一个密码子（3个核苷酸），3个
某大肠杆菌群体共1.0×10⁷个细胞，经UV处理后每个存活细胞平均带有10个需跨损伤合成的嘧啶二体。已知聚合酶V每通过一个损伤位点发生错配并导致突变（该位点突变）的概率为0.1，且各位点突变相互独立；只有10个损伤位点全部完成跨损伤合成、且至少一个位点发生突变的细胞计为突变体。（1）在SOS修复正常诱导的菌株中，90%的细胞能完成全部损伤的跨损伤合成，其余细胞死亡，求该群体产生的突变体细胞数；（2）在LexA阻遏蛋白不可被裂解的突变菌株中，仅1%的细胞能完成全部损伤的跨损伤合成，求该群体产生的突变体细胞数；（3）求两种情况下突变体细胞数之比。