基因工程的操作程序 — 生物学填空题

科研人员拟将某抗病基因构建到质粒上并导入大肠杆菌。该基因上游含EcoRⅠ识别序列、下游含BamHⅠ识别序列，基因内部无这两种酶的识别序列。若仅用EcoRⅠ同时切割含目的基因的DNA和质粒，再用DNA连接酶连接，可能得到目的基因自身环化、质粒自连以及目的基因____插入质粒等多种产物，重组效率低；改用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后连接，则可获得目的基因____插入的重组质粒，且能避免自身环化，这种构建方法称为____。