基因工程的工具酶与载体 — 生物学选择题

某目的基因两端分别含限制酶P、Q的识别序列，基因内部不含这两种识别序列；质粒载体上P、Q各有一个切点，位于一段可被替换的序列两侧，且载体含复制原点和筛选标记。P、Q切出的末端彼此不兼容。若要获得插入方向确定的重组质粒，最合理的操作是：A. 目的基因和载体分别用P、Q完全酶切，再用DNA连接酶连接 B. 目的基因和载体都只用P酶切，再用DNA连接酶连接 C. 目的基因和载体分别用P、Q酶切后，不加DNA连接酶即可形成重组质粒 D. 载体去除复制原点和筛选标记后，仍用P、Q酶切并连接目的基因