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在农杆菌介导的拟南芥转基因体系中,若目的基因被插入Ti质粒的T-DNA区以外,而T-DNA边界和Vir基因区均正常,则最可能的结果是___。
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为克隆某植物完整抗病基因(含启动子和内含子)以及其成熟转录本的编码区,团队分别将基因组DNA酶切片段克隆至噬菌体载体,将叶片mRNA反转录双链化后克隆至质粒载体。筛选完整基因时首选____文库,筛选不含内含子的表达序列时首选____文库。
某课题组鉴定三种未知生命实体:甲含单个环状双链DNA,基因间区短;乙含多条线性双链DNA,基因被内含子分割且重复序列比例高;丙含双链RNA,无细胞结构。下列关于三者基因组结构特征的判断,正确的是: A. 甲最可能为真核细胞生物,因其基因组存在大量非编码区 B. 乙最可能为原核细胞生物,因其基因通常连续编码 C. 丙最可能为真核细胞生物,因其具有双链核酸 D. 甲最可能为原核细胞生物,因其基因组通常由单条环状DNA构成且基因密度较高
某真核基因P启动子区CpG岛在肿瘤细胞中高度甲基化,表达沉默。对肿瘤细胞进行DNA去甲基化处理,使P启动子CpG岛甲基化水平显著下降,但P仍不表达;随后用组蛋白去乙酰化酶抑制剂处理,P表达恢复。据此推断最合理的是 A. DNA甲基化直接阻断RNA聚合酶II与启动子结合,去除甲基化即可恢复表达 B. DNA甲基化可招募甲基化结合蛋白与组蛋白去乙酰化酶形成致密染色质,去除甲基化后若组蛋白修饰未逆转,基因仍可沉默 C. DNA甲基化通过改变启动子核苷酸序列,使转录因子识别位点永久缺失 D. 启动子CpG岛去甲基化足以解除所有真核基因沉默,无需改变组蛋白修饰
某大肠杆菌菌株中,色氨酸操纵子的操纵基因发生突变,使阻遏蛋白完全无法结合,但前导序列(trpL)及衰减子结构完全正常。将该菌株分别置于高色氨酸和低色氨酸培养基中培养。下列关于两种条件下色氨酸合成酶系表达水平的叙述,正确的是:A. 两种条件下均高度表达,因为阻遏调控已失效 B. 高色氨酸条件下表达显著降低(受衰减作用调控),低色氨酸条件下高度表达 C. 两种条件下表达均很低,因为衰减子在高、低色氨酸时都会提前终止转录 D. 高色氨酸条件下高度表达,低色氨酸条件下表达降低
大肠杆菌色氨酸操纵子的衰减作用中,前导序列含序列1、2、3、4。当细胞内色氨酸充足时,核糖体顺利翻译前导肽并覆盖序列2,此时前导 mRNA 上优先形成的结构及其后果是( ) A. 序列2与序列3配对形成抗终止茎环,转录正常通读整个操纵子 B. 序列3与序列4配对形成终止子茎环并连接多聚U,使转录提前终止 C. 序列1与序列2配对形成茎环,阻止RNA聚合酶起始转录 D. 前导肽翻译继续延伸进入trp基因编码区,直接抑制翻译起始
某mRNA长度对应一条完整多肽的翻译全程需要200秒。翻译起始后,核糖体每隔25秒在起始位点重新起始一次,同一mRNA上可同时容纳多个核糖体(多聚核糖体),且每个核糖体完成翻译需200秒,起始位点无空间限制。假设t=0时第一个核糖体起始,问:(1) 翻译进行到稳定状态时,该mRNA上同时结合的核糖体最多有多少个?(2) 从起始开始计时,600秒内该mRNA共能合成出多少条完整的多肽链?请给出计算过程。
某大肠杆菌突变株的色氨酸操纵子前导序列中,区域2发生缺失,区域1、3、4及衰减子多聚U序列均正常。请回答:当培养基中色氨酸浓度很低时,由于核糖体停滞在区域1,区域2无法与其配对,区域3将转而与区域____(填编号)配对形成终止茎环结构,导致衰减作用照常发生,这与野生型低色氨酸条件下衰减被解除的结果____(填“相同”或“相反”)。由此可知,该突变株在低色氨酸条件下色氨酸合成酶系的表达量比野生型____(填“高”或“低”)。
某实验室在无细胞翻译体系中加入人工合成的mRNA:5'-GCAGCAGCA…-3'(GCA重复串联),翻译产物为多聚丙氨酸。若将模板换为重复串联的GCC,所得产物中氨基酸种类不变。该现象最直接地反映了遗传密码的哪一特点? A. 通用性,即所有生物共用同一套密码子 B. 简并性,即一种氨基酸可由多个密码子编码 C. 摆动性,即密码子第三位与反密码子配对不严格 D. 连续性,即密码子阅读无重叠也无间隔
大肠杆菌色氨酸操纵子的衰减作用中,前导序列的区域2、3、4可通过互补配对形成不同的茎环结构。某突变株的区域2因缺失而无法与任何区域配对,区域3、4及其下游的多聚U序列完整。当培养基中色氨酸严重缺乏、核糖体在前导肽翻译处停滞时,区域3将与区域____(填编号)配对形成终止子结构,导致 RNA 聚合酶在结构基因转录开始之前____(填“终止”或“不终止”)转录,即该突变株的衰减调节____(填“仍然发生”或“完全失效”)。
大肠杆菌核糖体为70S颗粒,其完整核糖体的总质量约为2700 kDa,由30S小亚基和50S大亚基组成。已知小亚基中含16S rRNA,质量约为500 kDa;大亚基中含23S rRNA和5S rRNA,质量分别约为1000 kDa和40 kDa;此外亚基中其余组分均为核糖体蛋白质。不考虑亚基结合时的质量损失,请计算一个完整70S核糖体中所含核糖体蛋白质的总质量,并据此说明核糖体的功能(如肽键催化)主要由哪类组分承担这一结论的含义。
某新合成多肽链需经历以下翻译后加工才能获得活性:N端一段由疏水残基组成的肽段被信号肽酶切除;链内第28位与第95位两个半胱氨酸残基的巯基被氧化相互连接;第158位丝氨酸残基被激酶磷酸化;最后由分子伴侣协助折叠成天然构象。下列关于上述加工过程的叙述,正确的是:A. 信号肽切除与二硫键形成均发生在核糖体上,依赖肽基转移酶催化 B. 二硫键的形成属于翻译后共价修饰,而磷酸化可逆地改变蛋白质活性且不改变其一级序列的氨基酸组成 C. 分子伴侣参与折叠时为肽链提供一级结构信息,决定其折叠的最终构象 D. 信号肽切除使多肽链氨基酸总数增加,磷酸化使肽链断裂
某前体蛋白由一条120个氨基酸残基的多肽链组成,经翻译后加工,切除N端的一段18个氨基酸残基的前导序列,同时肽链中10个谷氨酰胺残基全部发生脱酰胺修饰,转变为谷氨酸残基。请计算:(1) 加工后该成熟蛋白含有的氨基酸残基总数;(2) 该脱酰胺修饰过程中净释放出的氨分子(NH₃)数目。
在大肠杆菌翻译中,某mRNA起始密码子为AUG,编码一条120个氨基酸的多肽,终止密码子为UAG。已知起始阶段消耗1分子GTP;延伸阶段每掺入1个氨基酸消耗2分子GTP(进位和移位各1分子);终止阶段不消耗GTP,且由特异性释放因子识别终止密码子。则合成该多肽共消耗GTP分子数为____,识别UAG的释放因子为____。
某课题组拟克隆一段约 40 kb 的外源 DNA 片段。若选用 λ 噬菌体载体,其包装上限约为 50 kb 且要求外源片段长度达到一定范围才能被有效包装;若选用柯斯质粒(cosmid),其本身长约 5 kb,可容纳外源片段的大小主要受 λ 体外包装系统上限约束。综合比较,构建真核基因组文库时最常用于克隆 40 kb 左右大片段的载体类型是____,该类载体可容纳外源片段的典型大小约为 30~____ kb。