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大肠杆菌色氨酸操纵子的衰减作用中，前导序列含序列1、2、3、4。当细胞内色氨酸充足时，核糖体顺利翻译前导肽并覆盖序列2，此时前导 mRNA 上优先形成的结构及其后果是（ ） A. 序列2与序列3配对形成抗终止茎环，转录正常通读整个操纵子 B. 序列3与序列4配对形成终止子茎环并连接多聚U，使转录提前终止 C. 序列1与序列2配对形成茎环，阻止RNA聚合酶起始转录 D. 前导肽翻译继续延伸进入trp基因编码区，直接抑制翻译起始
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某mRNA长度对应一条完整多肽的翻译全程需要200秒。翻译起始后，核糖体每隔25秒在起始位点重新起始一次，同一mRNA上可同时容纳多个核糖体（多聚核糖体），且每个核糖体完成翻译需200秒，起始位点无空间限制。假设t=0时第一个核糖体起始，问：(1) 翻译进行到稳定状态时，该mRNA上同时结合的核糖体最多有多少个？(2) 从起始开始计时，600秒内该mRNA共能合成出多少条完整的多肽链？请给出计算过程。
某大肠杆菌突变株的色氨酸操纵子前导序列中，区域2发生缺失，区域1、3、4及衰减子多聚U序列均正常。请回答：当培养基中色氨酸浓度很低时，由于核糖体停滞在区域1，区域2无法与其配对，区域3将转而与区域____（填编号）配对形成终止茎环结构，导致衰减作用照常发生，这与野生型低色氨酸条件下衰减被解除的结果____（填“相同”或“相反”）。由此可知，该突变株在低色氨酸条件下色氨酸合成酶系的表达量比野生型____（填“高”或“低”）。
某实验室在无细胞翻译体系中加入人工合成的mRNA：5'-GCAGCAGCA…-3'（GCA重复串联），翻译产物为多聚丙氨酸。若将模板换为重复串联的GCC，所得产物中氨基酸种类不变。该现象最直接地反映了遗传密码的哪一特点？ A. 通用性，即所有生物共用同一套密码子 B. 简并性，即一种氨基酸可由多个密码子编码 C. 摆动性，即密码子第三位与反密码子配对不严格 D. 连续性，即密码子阅读无重叠也无间隔
大肠杆菌色氨酸操纵子的衰减作用中，前导序列的区域2、3、4可通过互补配对形成不同的茎环结构。某突变株的区域2因缺失而无法与任何区域配对，区域3、4及其下游的多聚U序列完整。当培养基中色氨酸严重缺乏、核糖体在前导肽翻译处停滞时，区域3将与区域____（填编号）配对形成终止子结构，导致 RNA 聚合酶在结构基因转录开始之前____（填“终止”或“不终止”）转录，即该突变株的衰减调节____（填“仍然发生”或“完全失效”）。
大肠杆菌核糖体为70S颗粒，其完整核糖体的总质量约为2700 kDa，由30S小亚基和50S大亚基组成。已知小亚基中含16S rRNA，质量约为500 kDa；大亚基中含23S rRNA和5S rRNA，质量分别约为1000 kDa和40 kDa；此外亚基中其余组分均为核糖体蛋白质。不考虑亚基结合时的质量损失，请计算一个完整70S核糖体中所含核糖体蛋白质的总质量，并据此说明核糖体的功能（如肽键催化）主要由哪类组分承担这一结论的含义。
某新合成多肽链需经历以下翻译后加工才能获得活性：N端一段由疏水残基组成的肽段被信号肽酶切除；链内第28位与第95位两个半胱氨酸残基的巯基被氧化相互连接；第158位丝氨酸残基被激酶磷酸化；最后由分子伴侣协助折叠成天然构象。下列关于上述加工过程的叙述，正确的是：A. 信号肽切除与二硫键形成均发生在核糖体上，依赖肽基转移酶催化 B. 二硫键的形成属于翻译后共价修饰，而磷酸化可逆地改变蛋白质活性且不改变其一级序列的氨基酸组成 C. 分子伴侣参与折叠时为肽链提供一级结构信息，决定其折叠的最终构象 D. 信号肽切除使多肽链氨基酸总数增加，磷酸化使肽链断裂
某前体蛋白由一条120个氨基酸残基的多肽链组成，经翻译后加工，切除N端的一段18个氨基酸残基的前导序列，同时肽链中10个谷氨酰胺残基全部发生脱酰胺修饰，转变为谷氨酸残基。请计算：(1) 加工后该成熟蛋白含有的氨基酸残基总数；(2) 该脱酰胺修饰过程中净释放出的氨分子（NH₃）数目。
在大肠杆菌翻译中，某mRNA起始密码子为AUG，编码一条120个氨基酸的多肽，终止密码子为UAG。已知起始阶段消耗1分子GTP；延伸阶段每掺入1个氨基酸消耗2分子GTP（进位和移位各1分子）；终止阶段不消耗GTP，且由特异性释放因子识别终止密码子。则合成该多肽共消耗GTP分子数为____，识别UAG的释放因子为____。
某课题组拟克隆一段约 40 kb 的外源 DNA 片段。若选用 λ 噬菌体载体，其包装上限约为 50 kb 且要求外源片段长度达到一定范围才能被有效包装；若选用柯斯质粒（cosmid），其本身长约 5 kb，可容纳外源片段的大小主要受 λ 体外包装系统上限约束。综合比较，构建真核基因组文库时最常用于克隆 40 kb 左右大片段的载体类型是____，该类载体可容纳外源片段的典型大小约为 30~____ kb。
某课题组拟构建一个哺乳动物基因组的BAC文库，需要挑选合适的克隆载体。下列关于常用克隆载体种类与特点的叙述，正确的是： A. BAC以细菌人工染色体为基础，可容纳约100~300 kb的外源DNA片段，且在宿主细胞中稳定性较高 B. 质粒载体可稳定插入200 kb左右的外源DNA，是构建大片段基因组文库的首选 C. 黏粒（cosmid）载体本身可容纳超过1000 kb的外源DNA，常用于测序人类基因组 D. YAC载体只能克隆10 kb以下的小片段DNA，主要适用于cDNA文库构建
某实验室以一段双链DNA为模板进行PCR扩增，反应体系中初始含目的片段双链分子800个，共进行20个循环。已知该反应的扩增效率为80%（即每一循环结束后，双链DNA分子总数变为上一循环结束时的1.8倍），且引物设计正确、无非特异扩增。请计算20个循环结束后体系中目的片段双链分子的理论总数（保留三位有效数字），并根据PCR基本原理说明：引物只能与模板单链的哪一端互补结合、延伸方向是什么？
某研究者计划克隆人胰岛素基因，已知该基因仅在胰岛β细胞中表达。为高效筛选获得该基因，应从胰岛____细胞提取总mRNA，经逆转录酶合成双链cDNA并构建____文库；与基因组文库相比，该文库的克隆不含____序列，因而可直接用于在原核表达系统中合成胰岛素。
某实验室提取了某哺乳动物基因组DNA和该动物肝脏组织的总RNA，分别进行了Southern杂交和Northern杂交，均使用针对同一基因X外显子2的标记探针。已知该基因X在肝脏细胞中存在一个外显子2的旁系同源拷贝（序列同源性约80%），且该基因在肝脏高表达，在肾脏低表达。请回答：（1）Southern杂交用限制酶酶切基因组DNA后转膜杂交，可用于检测基因X的____（如酶切片段大小、基因拷贝数等基因组水平信息）；（2）若要检测基因X在肝脏与肾脏组织中的表达量差异，应选择____杂交；（3）Northern杂交中，若探针在严谨性较低的条件下使用，可能因旁系同源拷贝mRNA的同源性而出现____条带，导致假阳性。
琼脂糖凝胶电泳中，双链DNA片段的迁移率主要受其分子大小与凝胶孔径的分子筛效应影响。现用同一浓度凝胶、同一电场条件对四个双链DNA片段A、B、C、D进行电泳，已知其碱基对数分别为500 bp、2000 bp、10000 bp、5000 bp。若四个片段的迁移率与碱基对数的负相关关系符合 v∝1/log(N) 的规律，则泳动最快（迁移率最大）的是片段____，泳动最慢的是片段____；若在正常电泳缓冲液（pH约8.0）中，DNA分子由于磷酸基团解离而带____电荷，因此由____极向____极迁移。
用Sanger双脱氧链终止法测定一段DNA。已知模板链为 3'-TACGGTAC-5'（8个碱基），测序反应中设四个平行管，分别额外加入少量ddATP、ddTTP、ddCTP、ddGTP。请回答：(1) 写出新生成的互补测序链序列（注明5'→3'方向）；(2) 在加入ddGTP的反应管中，各终止片段的长度（以核苷酸数表示）分别为多少？(3) 该管中最短终止片段的3'末端是哪种双脱氧核苷酸？
琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子在电场中的迁移距离可近似表示为 d = μ×E×t，其中 μ 为该DNA片段在特定凝胶中的迁移率（cm/(V·min)），E 为电场强度（V/cm），t 为电泳时间（min）。某实验中，一双链DNA片段在 5 V/cm 电场强度下电泳 40 min，测得迁移距离为 3 cm。求该DNA片段在此凝胶中的迁移率 μ。
某真核细胞系中，内源基因P的mRNA稳态水平为1400拷贝/细胞。现转入针对P的mRNA的双链siRNA，RNA干扰途径被激活，RISC切割P的mRNA使其一级动力学降解的速率常数由原来的0.1 h⁻¹增大到0.7 h⁻¹，同时基因P的转录速率保持不变。已知mRNA稳态水平与降解速率常数成反比。求：(1) 转入siRNA后P的mRNA新的稳态水平；(2) 若转入后6小时检测，P的mRNA水平约为多少拷贝/细胞（ln2≈0.693，e^(−4.2)≈0.015）？
某真核基因启动子的基础转录水平为2个单位，其上游增强子含三个转录因子结合位点。转录因子X结合后使转录水平提升4倍，Y提升3倍，Z提升2倍，各因子效应相互独立且可叠加（相乘）；该增强子经染色质重塑后通过DNA成环与启动子相互作用。已知实验中将该增强子倒置180°并远离启动子10 kb，各因子仍正常结合并发挥效应。则倒置并移位后该基因的转录水平为多少？ A. 12个单位 B. 24个单位 C. 48个单位 D. 6个单位
某真核细胞中，miRNA-a 与靶基因 X 的 mRNA 3'UTR 仅有部分互补序列，miRNA-b 的双链体与基因 Y 的 mRNA 编码区完全互补。两种小 RNA 分别转入细胞后各出现一种现象。下列哪一项结果最能说明该小 RNA 介导的是 RISC 对靶 mRNA 的直接切割降解，而非翻译抑制？ A. 转入 miRNA-a 后，X 的 mRNA 水平基本不变，但 X 蛋白量明显下降 B. 转入 miRNA-a 后，X 的 mRNA 水平与蛋白量同时下降 C. 转入 miRNA-b 后，Y 的 mRNA 水平基本不变，但 Y 蛋白量明显下降 D. 转入 miRNA-b 后，在 Y 的 mRNA 上可检测到切割位点，切割位置位于 miRNA-b 配对区中央对应的核苷酸之间